用多樣品冷凍研磨機(jī)研磨甘蔗葉提取RNA

       甘蔗是世界上最為重要的糖料作物，而且還是最具發(fā)展?jié)摿Φ木G色能源原料。 RNA提取是植物分子生物學(xué)和基因工程研究的前提，獲得完整、純度高的基因組RNA對(duì)研究的成功十分重要。
       目前發(fā)表的關(guān)于植物RNA提取的文獻(xiàn)很多，但不同植物和植物自身的不同部位都有其各自的特點(diǎn)，很難用一種方法來提取不同植物的RNA,甘蔗基因組RNA的提取是進(jìn)行甘蔗分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)，但由于甘蔗含有大量的酚和多糖等有機(jī)物質(zhì)，這些物質(zhì)極大的干擾RNA的提取。
       按照常規(guī)提取植物組織總RNA的方法提取甘蔗基因組RNA常常因產(chǎn)量小和純度低而不能滿足實(shí)驗(yàn)要求。
       影響甘蔗RNA提取質(zhì)量的另一個(gè)重要因素是提取材料,因?yàn)槔系闹参锝M織通常含有較多糖類及其他雜質(zhì)，此外甘蔗莖在液氮中研磨困難整節(jié)硬化)和莖節(jié)1~ 3節(jié)、根易褐化，導(dǎo)致甘蔗莖總RNA的提取質(zhì)量差和根中提取RNA量少。所以提取甘蔗基因組總RNA的材料應(yīng)盡量取用甘蔗嫩葉或把甘蔗莖榨成蔗汁團(tuán)。此外，為了避免外源RNA的污染,要盡量避免操作環(huán)境人員流動(dòng)帶來的污染,定期對(duì)操作環(huán)境進(jìn)行滅菌處理，還要盡可能地縮短實(shí)驗(yàn)過程，減少實(shí)驗(yàn)步驟因。
       因甘蔗葉片纖維含量比較高，所以傳統(tǒng)的研磨方式很難研磨，且研磨過程中RNA容易降解，而冷凍研磨儀正好解決此類難題。傳統(tǒng)的方式是手工研磨，因?yàn)闃颖倔w積小，又比較珍貴，手工研磨樣本損失比較嚴(yán)重，提出的RNA濃度非常低，所以冷凍研磨儀，樣本零損失，而且操作簡單便捷，可以批量處理，很好的解決了實(shí)驗(yàn)上提取RNA的問題。